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Verde chiaro SF giallastro, formula molecolare C37H37N2NaO9S3, CAS 5141-20-8, solitamente solubile in acqua o in alcuni solventi organici come etanolo, acetone, ecc. La sua solubilità è influenzata da fattori quali temperatura, tipo di solvente e concentrazione. La buona solubilità rende l'SF verde brillante facile da usare in soluzione, facilitando le operazioni di colorazione e rilevamento della fluorescenza. Essendo un SF verde brillante allo stato liquido o in soluzione, la sua densità e viscosità sono influenzate da fattori quali il tipo di solvente, la concentrazione e la temperatura. Allo stato puro o ad alta concentrazione, l'SF verde brillante può avere densità e viscosità più elevate; Nelle soluzioni diluite, queste proprietà fisiche diminuiranno corrispondentemente. Le caratteristiche più importanti sono la tonalità verde brillante e le forti proprietà di fluorescenza. Sotto l'irradiazione ultravioletta (UV), questo colorante può emettere una fluorescenza verde brillante e distinta, che lo rende ampiamente utilizzato nella colorazione biologica, nell'etichettatura fluorescente, nell'etichettatura di sicurezza e in altri campi.
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Formula chimica |
C37H34N2Na2O10S3 |
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Messa esatta |
808 |
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Peso Molecolare |
809 |
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m/z |
808 (100.0%), 809 (40.0%), 810 (13.6%), 811 (5.4%), 810 (5.1%), 810 (2.7%), 809 (2.4%), 810 (2.1%) |
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Analisi elementare |
C, 54,94; H, 4,24; N, 3,46; Na, 5,68; O, 19,78; S, 11.89 |
Verde brillante SF (giallo pallido), noto anche come verde acido 5, verde brillante (giallo pallido), verde brillante 2G, verde brillante S, verde brillante 2GN, verde acido, giallo verde chiaro SF, verde chiaro SF giallo pallido, giallo verde brillante, verde acido SF,verde chiaro SF giallastro, ecc., è un prodotto chimico ampiamente utilizzato in molteplici campi.
1. Campo biologico
(1) Colorazione citologica:
Comunemente utilizzato per la controcolorazione in citologia, soprattutto negli esperimenti istologici e di biologia cellulare, per migliorare la visibilità delle strutture cellulari. Può visualizzare chiaramente citoplasma, organelli e strutture cellulari specifiche, fornendo ai ricercatori informazioni morfologiche cellulari dettagliate.
(2) Alternativa nella procedura di Gomori:
Nel metodo di colorazione tricromica di Gomori, può essere utilizzato come sostituto del blu di anilina. La colorazione tricromica di Gomori è un metodo di colorazione utilizzato per l'identificazione del tipo di fibra muscolare, che rende il metodo più flessibile ed efficace in condizioni specifiche.
(3) Rilevazione delle proteine:
Viene anche utilizzato per rilevare le proteine, soprattutto negli esperimenti di biochimica e biologia molecolare. Può indicare la presenza e il contenuto di proteine formando con esse complessi specifici o cambiando colore.
(4) Correlati al trattamento della malattia:
Gli studi hanno dimostrato che i suoi analoghi possono svolgere un ruolo nel trattamento delle malattie associate all'apolipoproteina E (ApoE). Sebbene la ricerca in questo settore sia ancora nelle fasi iniziali, vale la pena prestare attenzione alle sue potenziali prospettive applicative.
2. Campo medico
(1) Diagnosi clinica:
Può essere utilizzato per preparare reagenti diagnostici clinici per assistere i medici nella diagnosi precoce e nella diagnosi differenziale delle malattie. Questi reagenti possono indicare lo stato della malattia rilevando cambiamenti di colore o altri segnali in base alle loro interazioni con biomolecole o cellule specifiche.
(2) Istopatologia:
Nello studio dell'istopatologia, la colorazione delle sezioni di tessuto viene comunemente utilizzata per rivelare la struttura del tessuto e i cambiamenti patologici. Può aiutare i patologi a diagnosticare le malattie in modo più accurato e a valutarne la gravità e la prognosi.
3. Campo di ricerca
Ha una posizione importante nel campo della ricerca scientifica, in particolare nella biologia e nella ricerca medica.
Controcolorazione citologica: comunemente usata come agente di controcolorazione in citologia, può mostrare chiaramente la struttura e la morfologia cellulare.
Sostituto del passaggio di Gomori: nel metodo di colorazione di Gomori, può essere utilizzato come sostituto del blu di anilina per la colorazione specifica dei tessuti.
Colorazione del plasma: come agente di colorazione del plasma, può colorare il citoplasma delle cellule, il che aiuta a osservare e studiare la struttura interna delle cellule.
Colorazione dei tessuti animali: nella colorazione dei tessuti animali, viene comunemente utilizzata per colorare parti specifiche del tessuto animale, come muscoli, tessuto connettivo, ecc.
Colorazione comparativa: può essere confrontata con l'ematossilina o altri coloranti nucleari per evidenziare diverse strutture nel tessuto.
Colorazione dei tessuti vegetali: nell'istologia vegetale viene utilizzata per colorare il citoplasma e le fibre, che possono visualizzare chiaramente la morfologia e la struttura delle cellule vegetali.
4. Ricerca biochimica
Svolge anche un ruolo importante nella ricerca biochimica.
Reagenti biochimici: possono essere utilizzati come reagenti per elettroforesi, reagenti per cromatografia, reagenti per separazione per centrifugazione, reagenti per test immunologici, reagenti per etichettatura, reagenti per chimica dei tessuti e altri reagenti biochimici per la separazione, purificazione e rilevamento di biomolecole.
Ricerca cancerogena: utilizzata anche nello studio degli agenti cancerogeni per valutarne i potenziali rischi per la salute.
Additivo del terreno di coltura: nella coltura microbica, può essere utilizzato come additivo nel terreno di coltura per promuovere la crescita e la riproduzione dei microrganismi.
5. Diagnosi medica
Ha anche un valore significativo nel campo della diagnosi medica.
Colorazione istopatologica: in istopatologia, è comunemente utilizzata per la colorazione tricromica di Masson della fibra di collagene, la colorazione Pap, la colorazione policroma citologica e la colorazione microbiologica di sezioni di tessuto per diagnosticare malattie e osservare il processo delle lesioni.
Ricerca neuroscientifica: il metodo di colorazione multicolore- può essere utilizzato per differenziare le cellule secretorie dell'ipofisi, il che aiuta a studiare la struttura e la funzione del sistema nervoso.
Colorazione immunoistochimica: nella colorazione immunoistochimica, può essere utilizzato come agente colorante ausiliario per visualizzare la distribuzione di antigeni o anticorpi specifici.
6. Altre applicazioni
Oltre ai campi sopra menzionati, ha anche le seguenti applicazioni.
Colorante per alimenti e bevande: è un colorante consentito per l'uso in alimenti e bevande, che può conferire al cibo un colore verde brillante.
Insetticidi: in alcuni casi possono essere utilizzati anche come insetticidi per controllare il numero e la distribuzione dei parassiti.
Monitoraggio ambientale: può essere utilizzato anche per il monitoraggio ambientale, come test sulla qualità dell'acqua, valutazione dell'inquinamento del suolo, ecc.
Informazioni di base e preparazione delle materie prime
Materie prime per la produzione diVerde chiaro SF giallastrodevono essere sottoposti ad uno screening rigoroso. Le materie prime principali includono N,N-dietilanilina (purezza maggiore o uguale al 99%, umidità minore o uguale allo 0,5%), 3-sulfobenzaldeide (purezza maggiore o uguale al 98%), acido solforico concentrato di tipo industriale (concentrazione 98%), idrossido di sodio (purezza maggiore o uguale al 96%) e dicromato di sodio (ossidante). Il materiale ausiliario è una soluzione satura di cloruro di sodio (per la salatura). Tutte le materie prime devono essere conformi agli standard industriali GB/T per evitare che le impurità influenzino il colore e l'uniformità della tintura del prodotto.
Processo di sintesi del nucleo
Il processo di sintesi viene eseguito in quattro fasi, con temperatura e valore di pH controllati durante l'intero processo:
Reazione di condensazione:
Aggiungere acido cloridrico al bollitore di reazione per regolare il pH del sistema su 1–2, quindi aggiungere N,N-dietilanilina e 3-sulfobenzaldeide in un rapporto molare di 1:1,2. Riscaldare la miscela a 40–50 gradi e agitare a temperatura costante per 3–5 ore per generare un intermedio triarilmetano. Durante la reazione è necessario introdurre continuamente gas inerte (azoto) per prevenire l'ossidazione dell'intermedio.
Ossidazione e solfonazione:
Aggiungere lentamente la soluzione di bicromato di sodio al sistema, riscaldare a 60–70 gradi per l'ossidazione per 2–3 ore, quindi aggiungere acido solforico fumante come agente solfonante e riscaldare a 80–90 gradi per la solfonazione per 1–2 ore per introdurre gruppi di acido solfonico e migliorare la solubilità in acqua del prodotto. Durante la solfonazione è necessaria un'agitazione uniforme per evitare la formazione di sottoprodotti-causati dal surriscaldamento locale.
Neutralizzazione e Salatura:
Neutralizza lentamente la soluzione di reazione a pH 7–8 con una soluzione di idrossido di sodio al 40% per generare sale disodico solubile in acqua-. Dopo aver lasciato riposare e raffreddare a temperatura ambiente, aggiungere lentamente la soluzione satura di cloruro di sodio e mescolare finché non precipita una grande quantità di solido. Dopo aver lasciato riposare per 4 ore per la precipitazione, filtrare per ottenere un panello di filtrazione grezzo.
Purificazione ed essiccazione:
Lavare ripetutamente il pannello di filtrazione con acqua deionizzata per 3-4 volte fino a quando la soluzione di lavaggio diventa neutra (nessun residuo di ioni cloruro). Quindi posizionare la torta in un forno sottovuoto e asciugarla a 60–70 gradi sotto un vuoto di -0,08~-0,09 MPa per 8 ore. Dopo la frantumazione, passare al setaccio da 80 maglie per ottenere la tintura finita.
Standard di controllo qualità
Il prodotto finito deve superare numerosi test e rispettare gli standard del settore:
Requisiti di purezza: La purezza è un indicatore fondamentale che determina il potere colorante del colorante e l'effetto applicativo e i metodi di rilevamento sono standardizzati in base alle qualità del prodotto. Per i prodotti industriali generici-Light Green SF Yellowish, il contenuto di colorante, quantificato mediante spettrofotometria alla lunghezza d'onda di assorbimento massima (629–634 nm), non deve essere inferiore all'80%. Per i prodotti di-colorazione biologica di fascia alta-utilizzati nell'analisi microscopica e nel rilevamento clinico, si applicano criteri di purezza più rigorosi: la purezza deve essere maggiore o uguale all'85% (metodo spettrofotometrico) e la purezza della cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC) deve essere maggiore o uguale al 99%. Questo rigoroso requisito HPLC garantisce l'assenza di tracce di impurità che potrebbero interferire con i risultati della colorazione o compromettere la sicurezza biologica.
Indicatori chiave: Una serie di indicatori chiave vengono testati per garantire la stabilità e l'applicabilità del colorante in vari scenari. La lunghezza d'onda massima di assorbimento è rigorosamente controllata nell'intervallo 629–634 nm, con un'assorbanza maggiore o uguale a 0,85, che garantisce un'intensità di colorazione e prestazioni spettrali costanti. Il contenuto di umidità non deve superare il 5% per evitare incrostazioni durante lo stoccaggio e il degrado dell'attività colorante; il contenuto di ceneri è limitato a meno o uguale al 3% per ridurre le impurità inorganiche che potrebbero influire sulla solubilità e sull'uniformità della colorazione. Per quanto riguarda gli indicatori di sicurezza, il contenuto totale di metalli pesanti (compresi piombo, arsenico, mercurio e cadmio) deve essere inferiore o uguale a 10 ppm, pienamente conforme allo standard nazionale sugli additivi alimentari GB 2760, soddisfacendo così i requisiti di sicurezza per le applicazioni di coloranti alimentari e reagenti biologici.
Prova di stabilità: Vengono condotti test di stabilità per verificare la durabilità del prodotto durante lo stoccaggio e la resistenza a condizioni difficili. In condizioni di conservazione standard-confezione sigillata, ambiente buio e temperatura ambiente (20–25 gradi)-il prodotto finito deve avere una durata di conservazione non inferiore a 2 anni, senza evidenti cambiamenti di colore, solubilità o prestazioni coloranti. Per il test di stabilità termica, il prodotto viene collocato in un ambiente a temperatura costante-a 60 gradi per 72 ore; dopo il test, non si noterà alcuno sbiadimento evidente e il potere colorante dovrà rimanere maggiore o uguale al 95% del valore iniziale, garantendone l'adattabilità ad ambienti di lavorazione o conservazione ad alta-temperatura.
Norme sulla sicurezza della produzione e sulla tutela dell'ambiente
La produzione deve essere conforme agli standard GMP e di protezione ambientale:
L'officina è dotata di una torre di assorbimento dei gas di coda acidi per il trattamento dei gas HCl e SO₂ generati durante la condensazione e la solfonazione, che vengono scaricati a norma dopo la neutralizzazione con liscivia.
Le acque reflue di produzione vengono prima regolate a pH 6–9 in un serbatoio di neutralizzazione, quindi trattate mediante precipitazione con flocculazione e processi biochimici e scaricate solo quando il COD è inferiore o uguale a 50 mg/l e il croma inferiore o uguale a 50 volte.
Gli operatori devono indossare indumenti protettivi resistenti agli acidi-, maschere antigas e guanti protettivi per evitare che il colorante entri in contatto con la pelle e le vie respiratorie.
Il prodotto finito deve essere confezionato ermeticamente e conservato in un magazzino fresco e asciutto, lontano da agenti ossidanti, e non deve essere immagazzinato insieme ad alimenti e prodotti farmaceutici.
Verde chiaro SF giallastroha una vasta gamma di applicazioni negli studi istologici e patologici come colorante istologico per il collagene.
Obiettivo dello studio: Osservare e analizzare la distribuzione e la struttura del collagene nei tessuti cutanei.
Metodo di colorazione: colorazione di sezioni di tessuto cutaneo utilizzando il verde brillante SF.
Risultati: dopo la colorazione, le fibre di collagene hanno mostrato un colore verde distinto, mentre altre strutture tissutali hanno mostrato colori diversi. Ciò consente ai ricercatori di osservare chiaramente la direzione, la distribuzione e la morfologia delle fibre di collagene e quindi di analizzare la struttura e la funzione dei tessuti cutanei.
Applicazione: i risultati di questo studio aiutano a comprendere i cambiamenti fisiologici e patologici del tessuto cutaneo, fornendo una base importante per la ricerca e il trattamento delle malattie della pelle.
Background: La crescita e l'invasione del tumore sono spesso strettamente correlate ai cambiamenti strutturali dei tessuti circostanti, in particolare ai cambiamenti delle fibre di collagene.
Metodo di colorazione: le sezioni di tessuto tumorale sono state colorate con verde brillante SF per osservare la morfologia e la distribuzione delle fibre di collagene.
RISULTATI: Nei tessuti tumorali, la distribuzione e la morfologia delle fibre di collagene hanno subito cambiamenti significativi, come ispessimento, disorganizzazione o rottura delle fibre. Questi cambiamenti erano strettamente correlati al grado di malignità, all’aggressività e alla prognosi del tumore.
Applicazione: Attraverso l'analisi delle fibre di collagene, i ricercatori possono valutare l'aggressività e la prognosi dei tumori, fornendo un importante riferimento per lo sviluppo di piani di trattamento per i tumori.
Scopo dello studio: indagare i cambiamenti delle fibre di collagene nelle malattie fibrotiche e la loro relazione con la progressione della malattia.
Materiali sperimentali: Campioni di tessuto di pazienti con malattie fibrotiche.
Procedura di colorazione: colorazione di campioni di tessuto utilizzando il verde brillante SF per osservare la morfologia e il numero di fibre di collagene.
Risultati: Nelle malattie fibrotiche, il numero di fibre di collagene è aumentato in modo significativo e la morfologia è cambiata in modo anomalo. Questi cambiamenti sono strettamente correlati alla gravità e alla progressione della malattia.
Applicazione: questo studio aiuta a rivelare la patogenesi delle malattie fibrotiche e fornisce nuove idee e metodi per la diagnosi e il trattamento delle malattie.
Background: il tessuto osseo è composto principalmente da collagene e minerali e il collagene svolge un ruolo importante nella struttura e nella funzione del tessuto osseo.
Metodo di colorazione: sono state colorate sezioni di tessuto osseoVerde chiaro SF giallastroper osservare la distribuzione e la morfologia del collagene.
Risultati: Dopo la colorazione, le fibre di collagene nel tessuto osseo hanno mostrato un colore verde chiaro, che ha permesso ai ricercatori di osservare con precisione la distribuzione e la morfologia del collagene nel tessuto osseo.
APPLICAZIONI: I risultati di questo studio possono aiutare a comprendere i cambiamenti fisiologici e patologici nel tessuto osseo e fornire una base importante per la ricerca e il trattamento delle malattie ossee.
In sintesi, il verde brillante SF come colorante istologico per il collagene ha un'ampia gamma di applicazioni nella ricerca istologica e patologica. Attraverso l'osservazione e l'analisi della colorazione, i ricercatori possono osservare chiaramente la distribuzione, la morfologia e i cambiamenti strutturali delle fibre di collagene, quindi comprendere lo stato fisiologico e patologico dei tessuti, fornendo una base importante per la diagnosi e il trattamento delle malattie.
Domande frequenti
Cosa macchia il verde chiaro sf?
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Light Green SF Yellowish è un colorante triarilmetano verde. È utilizzato in istologia per la colorazionecollagene. Si presenta come una polvere brunastra-da rosso a viola ed è solubile in acqua fredda. Sinonimi: verde acido 5; Verde acido veloce N; Midori205.
Cos'è l'SF verde chiaro nel Pap test?
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Il verde chiaro SF è un colorante acido che colora di verde il citoplasma delle cellule metabolicamente attive, ovvero cellule squamose intermedie, cellule parabasali, cellule endocervicali, istiociti, leucociti, cellule di carcinoma indifferenziato e cellule di adenocarcinoma.
Il citoplasma si colora di verde chiaro?
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Le strutture in una sezione di tessuto sono colorate come segue: i sali di calcio sono colorati di nero, i nuclei di rosso e il citoplasma di rosa.Se questa colorazione viene eseguita con Light Green, i sali di calcio saranno colorati di nero, i nuclei di verde più scuro e il citoplasma di verde.
Il verde chiaro macchia il collagene?
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Il verde chiaro è il colorante standard nel Nord America per colorare il collagenein contrasto con la fucsina acida nella tricromia di Masson. È un componente della serie EA di Papanicolaou insieme all'eosina Y e al marrone bismarck. È anche ampiamente utilizzato nell'istologia vegetale.
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