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Polvere colorante Giemsaè una polvere blu viola con la formula chimica C14H14ClN3S, CAS 51811-82-6 e un peso molecolare di 291,7991. È facilmente solubile in quantità uguali di metanolo e glicerolo, formando una soluzione blu infiammabile. Il pigmento Giemsa fu formulato e applicato per la prima volta alla colorazione biologica da Gustav Giemsa, un chimico e batteriologo tedesco di Amburgo, alla fine del XIX secolo. I suoi componenti principali includono una miscela di Azure II e Azure II eosina, che gli consente di mostrare una buona selettività e contrasto durante la colorazione di diverse strutture biologiche. Applicato in altri studi specifici.

Ad esempio, nella ricerca immunoistochimica, i pigmenti di Giessen possono essere utilizzati come agenti coloranti ausiliari per aiutare i ricercatori a osservare e analizzare meglio i risultati delle reazioni antigene-anticorpo; Nel monitoraggio ambientale, i pigmenti Giemys possono essere utilizzati per studi di colorazione e conteggio di alcuni microrganismi; Negli esperimenti biochimici, i pigmenti Giemys possono essere utilizzati anche per la colorazione e il rilevamento di determinati enzimi o proteine. Essendo un colorante analitico efficiente e multifunzionale, ha ampie prospettive di applicazione nei campi della biologia e della medicina. Che si tratti di ricerca genetica, ricerca citologica o diacrisi patologica, è necessario utilizzare la tecnologia di colorazione Giemys per rivelare la microstruttura e le caratteristiche morfologiche dei campioni biologici.


Polvere colorante Giemsa, numero CAS 51811-82-6, noto anche come macchia Giemsa, colorante Giemsa o soluzione colorante Giemsa, è un colorante classico formulato e applicato per la prima volta nel campo della colorazione biologica da Gustav Giemsa, un chimico e batteriologo tedesco di Amburgo. Il suo aspetto è una polvere cristallina che va dal verde al nero al verde scuro, e la soluzione diventa blu quando disciolta in metanolo e glicerolo. La soluzione preparata è infiammabile.
Il pigmento del Gi contiene principalmente una miscela di eosina Azzurro II e Azzurro II. La soluzione Gi rosso scuro disponibile in commercio è costituita da Azzurro B, Azzurro II eosina e blu di metilene (alcalino) in un rapporto di massa di 1:12:2, disciolto in glicerolo: metanolo=5:24 in volume, con una concentrazione totale dello 0,6% in massa e una densità di 0,89 g/cm ³ a 20 gradi. Come colorante neutro, occupa una posizione fondamentale nella ricerca biomedica. La sua vasta gamma di applicazioni e le sue potenti funzioni possono essere considerate come il "coltellino svizzero" nel campo della colorazione biologica.
1. Colorazione biologica originale
L'utilizzo più classico e fondamentale è senza dubbio come colorante biologico originale. Questa applicazione abbraccia molteplici discipline come parassitologia, microbiologia ed ematologia ed è uno strumento fondamentale essenziale nei laboratori di tutto il mondo.
1.1 Metodo di rivestimento del sangue per la rilevazione dei parassiti della malaria
Questa è l'applicazione più-conosciuta del pigmento Gi. Nella diacrisi della malaria, il parassita della malaria può essere perfettamente colorato per rendere la sua morfologia chiara e distinguibile all'interno degli emociti rossi.
Che si tratti di Plasmodium vivax, Plasmodium falciparum o di altre specie, dopo la colorazione, il nucleo del parassita della malaria appare rosso e il citoplasma appare blu, formando un netto contrasto con lo sfondo. Questa caratteristica consente la rapida identificazione degli emociti rossi infetti a basso ingrandimento, rendendolo uno dei metodi "gold standard" per lo screening globale della malaria e della diacrisi. Nelle istituzioni mediche delle regioni tropicali e subtropicali, l'esame dello striscio di sangue con la colorazione di Giemys è quasi il primo ostacolo per la conferma dei casi di malaria.
1.2 Ispezione dei tripanosomi
Il tripanosoma è il principale colpevole della tripanosomiasi africana (malattia del sonno) e della malattia di Chagas. Ha anche un eccellente effetto colorante sui tripanosomi e può mostrare chiaramente le caratteristiche strutturali del tripanosoma, del nucleo e dei flagelli. Sugli strisci di sangue, la morfologia del Trypanosoma dopo la colorazione è distinta e facilmente distinguibile dagli emociti, fornendo una prova affidabile della diacrisi clinica.
1.3 Colorazione della spirocheta patogena
Lo stesso vale per varie spirochete patogene, tra cui Leptospira e Borrelia. Le malattie causate da queste spirochete, come la leptospirosi e la malattia di Lyme, possono essere esaminate preliminarmente utilizzando la microscopia in campo oscuro o la microscopia ottica convenzionale con colorazione Giemys.Polvere colorante Giemsapuò rendere chiaramente visibile la struttura a spirale e la struttura interna della spirocheta, guadagnando tempo prezioso per la diagnosi precoce delle malattie.
2. Ematologia e morfologia cellulare
Altrettanto profonda ed estesa è l'applicazione nel campo dell'ematologia, che lo rende l'"eroe dietro le quinte" dell'analisi morfologica degli emociti.
2.1 Differenziazione della morfologia degli emociti
Può differenziare accuratamente la morfologia delle piastrine, degli emociti rossi, degli emociti bianchi e di altri tipi di cellule. Gli emociti rossi sono colorati di rosa, il nucleo degli emociti bianchi è colorato di rosso porpora e il citoplasma è colorato di azzurro. Diversi tipi di emociti bianchi (neutrofili, eosinofili, basofili, linfociti, monociti) mostrano colori e forme distinti sotto la loro colorazione a causa delle loro diverse caratteristiche granulari.
Ciò consente agli sperimentatori di eseguire rapidamente la classificazione e il conteggio degli emociti bianchi, che è un metodo classico per la classificazione degli emociti bianchi nella conta completa degli emociti (CBC).
2.2 Colorazione con perossidasi
Può essere utilizzato per colorare la perossidasi, che ha un valore importante nella classificazione e nella diacrisi della leucemia. Diversi tipi di cellule leucemiche hanno diverse attività di perossidasi, che possono presentare reazioni positive o negative dopo la colorazione, fornendo indizi chiave per la differenziazione tra leucemia mieloide acuta (LMA) e leucemia linfocitica acuta (LLA).
3. Colorazione cromosomica e ricerca genetica
Anche nel campo della citogenetica i pigmenti Giemys brillano brillantemente.
3.1 Tecnica del bendaggio del cromosoma G-
Il pigmento di Giessen è un reagente fondamentale per la preparazione del bendaggio del cromosoma G-. Attraverso il trattamento specifico con la trypsin e la colorazione del pigmento di Giemy, le 23 paia di cromosomi umani possono mostrare caratteristici motivi a strisce chiare e scure. Questo modello di bande è come un'"impronta digitale" dei cromosomi, consentendo di identificare accuratamente ciascun cromosoma, fornendo un mezzo tecnico insostituibile per l'analisi del cariotipo cromosomico e il rilevamento di anomalie cromosomiche (come la sindrome di Down, la sindrome di Crohn, ecc.).
La tecnologia del banding G- è ancora il metodo standard nei laboratori di genetica clinica per la diacrisi prenatale e lo screening delle malattie genetiche.
3.2 Ricerca sulla coltivazione organizzativa
Ampiamente utilizzato nella ricerca sulle colture di tessuti per osservare la morfologia, lo stato di proliferazione e i cambiamenti cromosomici delle cellule in coltura. Negli esperimenti di biologia cellulare, i ricercatori utilizzano i pigmenti di Giessen per colorare le cellule in coltura per valutare lo stato di salute delle cellule, rilevare anomalie cromosomiche, osservare i cambiamenti del ciclo cellulare e altro ancora.
4. Colorazione virale, rickettsia e microbica
La sua capacità di colorazione va ben oltre quella dei parassiti e delle cellule consanguinee ed è ugualmente efficace contro vari microrganismi.
4.1 Colorazione virale
Può essere utilizzato per l'osservazione della colorazione di alcuni virus. Sebbene la microscopia elettronica sia diventata lo strumento principale per la ricerca sui virus, la colorazione può ancora essere utilizzata per l’osservazione preliminare e lo screening dei corpi inclusi del virus in laboratori con risorse limitate.
4.2 Colorazione di Rickettsia
La rickettsia è un tipo di organismo procariotico parassitario intracellulare obbligato che può causare malattie gravi come il tifo e il tifo arbustivo. La capacità di colorare e visualizzare in modo efficace la posizione e la morfologia della rickettsia nelle cellule ospiti fornisce un mezzo importante per la diacrisi di laboratorio dell'infezione da rickettsia.
4.3 Esame istologico di più microrganismi
Può anche essere applicato per colorare vari microrganismi nell'esame istologico. Nelle sezioni patologiche, può aiutare i patologi a identificare i microrganismi patogeni nei tessuti e fornire prove ausiliarie per la diacrisi patologica delle malattie infettive.
5. Chimica Analitica e Reagenti Biochimici
Polvere colorante Giemsal'applicazione va ben oltre la colorazione biologica ed è anche un versatile "esperto transfrontaliero" nei campi della chimica analitica e della biochimica.
5.1 Analisi e determinazione degli ioni metallici
Può essere utilizzato come reagente per l'analisi e la determinazione degli ioni metallici. La ricerca ha dimostrato che il sistema periodato di potassio del pigmento di rutenio (III) - Giemys può essere utilizzato per la determinazione spettrofotometrica cinetica catalitica di tracce di rutenio con elevata sensibilità e buona selettività.
Inoltre può essere utilizzato anche per determinare il contenuto di sostanze bioattive come indolo, scatolo, uroblue, triptofano ed ergotamina.
5.2 Indicatore acido-base
Ha le caratteristiche di un indicatore acido-base. Il suo intervallo di cambiamento di colore è simile a quello di alcuni acidi organici e può subire cambiamenti di colore in specifiche condizioni di pH, indicando l'acidità o l'alcalinità della soluzione.

Secondo i dati, l'intervallo di cambiamento di colore del 2,4-dinitrofenolo è 2,8-4,4, con il colore che cambia da incolore a giallo, e mostra anche diversi cambiamenti di tonalità di colore in diversi ambienti di pH.
5.3 Distinguere tra rash da siero e scarlattina
Nella diacrisi clinica, può essere utilizzato anche per distinguere tra rash sierico e scarlattina. Queste due malattie presentano somiglianze nelle manifestazioni cliniche, ma attraverso la colorazione degli strisci di consanguineità si possono osservare diversi modelli di risposta cellulare, che possono aiutare i medici a fare diagnosi differenziali.
6. Industria dei coloranti e sintesi di coloranti termici-sensibili alla pressione
Nel campo dell'industria dei coloranti ha anche un valore applicativo significativo che non può essere ignorato.
6.1 Intermedi coloranti
Può essere utilizzato come intermedio colorante e partecipare alla preparazione di vari coloranti sintetici. I componenti di azurolo ed eosina nella sua struttura molecolare gli conferiscono proprietà ottiche e reattività chimica uniche, rendendolo un'importante materia prima per la sintesi di altri coloranti funzionali.
6.2 Sintesi di coloranti sensibili alla pressione-
Una delle applicazioni più distintive dei pigmenti Gi nel campo dei coloranti è la loro capacità di sintetizzare coloranti sensibili alla pressione-. I coloranti sensibili alla pressione sono un tipo di colorante funzionale che può subire cambiamenti di colore se sottoposto a variazioni di pressione o temperatura. Sono ampiamente utilizzati in campi high-tecnologici come la stampa termica, i sensori di pressione e le etichette anti-contraffazione. I composti azurol tra loro sono precursori ideali per sintetizzare tali coloranti grazie alle loro proprietà redox uniche.
7. Soluzione colorante composita Ruishi Jimsa
Negli ultimi anni, la soluzione colorante composita Roche Giemsa basata su di esso ha compiuto progressi significativi nel campo della tecnologia di rilevamento medico. La soluzione colorante composita comprende componenti come il colorante di Reye, il colorante del pigmento di Gie, il metanolo, il glicerolo e i tensioattivi. Aggiungendo tensioattivi è possibile accelerare la dissoluzione dei coloranti e l'ingresso di piccole molecole di colorante nelle cellule durante il processo di tintura.
Questa innovazione tecnologica ha apportato notevoli miglioramenti in termini di efficienza: la soluzione colorante deve essere lasciata in uso solo per 2 giorni (i metodi tradizionali richiedono diverse settimane per maturare) e il tempo di colorazione richiede solo 2-3 minuti per ottenere buoni risultati di colorazione. Con la premessa di garantire una colorazione chiara delle cellule consanguinee e ottimi effetti di colorazione su citoplasma, granuli, nuclei, ecc., il tempo di colorazione e quello diagnostico vengono notevolmente ridotti. Se utilizzato insieme a strumenti automatizzati, l'efficienza della colorazione può essere notevolmente migliorata. Questo risultato ha ottenuto un brevetto di invenzione nazionale (CN201910162711.1, numero di pubblicazione CN109971212A), segnando un nuovo livello nella sua applicazione nei moderni test medici.
8. Medicina veterinaria e ricerca sul bestiame - Tutela della salute degli animali
Ha anche una vasta gamma di applicazioni nel campo della medicina veterinaria. Ad esempio, nell'isolamento e nell'analisi immunofenotipica delle cellule natural killer (cellule NK) nei polli,Giemsa macchia in polverei pigmenti vengono utilizzati per la colorazione cellulare e l'osservazione morfologica. Nella pratica zootecnica e veterinaria può essere utilizzato per l'esame dei parassiti consanguinei degli animali come Trypanosoma e Babesia, fornendo supporto tecnico per la prevenzione e il controllo delle malattie animali.
Domande frequenti
Cosa rileva la macchia di Giemsa?
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La colorazione Giemsa viene utilizzata per differenziare la morfologia nucleare e/o citoplasmatica di piastrine, globuli rossi, globuli bianchi e parassiti (1,2). La colorazione più affidabile per i parassiti del sangue, in particolare negli film spessi, è la colorazione Giemsa contenente l'azzurro B. La soluzione liquida è disponibile in commercio.
Come si prepara la colorazione Giemsa per la malaria?
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La colorazione Malaria Giemsa rileva i parassiti Plasmodium colorando gli strisci di sangue con una soluzione pH-dipendente (tipicamente pH 7,2). La procedura prevede il fissaggio di pellicole sottili con metanolo, lasciando le pellicole spesse non fissate per la deemoglobinizzazione, seguite da una soluzione Giemsa dal 3% al 10% per 10-60 minuti, che colora i nuclei del parassita in rosso e il citoplasma in blu.
La macchia di Giemsa può rilevare i batteri?
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La colorazione Wright-Giemsa rileva efficacemente piccole quantità di batteri, batteri con pareti cellulari atipiche e micoplasmi.
Di che colore è la macchia Giemsa?
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La colorazione Giemsa produce un effetto differenziale e policromatico, che dà origine a nuclei blu/viola, citoplasma azzurro ed eritrociti rosa. È una colorazione di "tipo Romanowsky-", che utilizza blu di metilene/azzurro ed eosina per colorare le strutture acide blu scuro/viola e le strutture basiche rosa.
In cosa è ampiamente utilizzata la colorazione Giemsa?
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La soluzione colorante di Giemsa (composta da blu di metilene, azzurro ed eosina) è una delle colorazioni microscopiche più popolari, comunemente utilizzata in ematologia, istologia, citologia e batteriologia per uso diagnostico in vitro (IVD).
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