Polvere Iptg CAS 367-93-1

Polvere Iptgpuò essere utilizzato per il sito di azione anestetico locale, viene applicato come agente di diffusione per alleviare il dolore della ferita post-operatoria e il dolore dell'ulcera. Reagenti biologici molecolari comunemente utilizzati nello screening delle macchie blu e bianche e nell'espressione proteica indotta da IPTG nei batteri. IPTG, nome completo isopropil- - D-tiogalattoside, CAS 367-93-1, formula molecolare C9H18O5S, peso molecolare 384,37 Dalton, appartiene ai composti a piccole molecole. Polvere bianca o quasi bianca, con bassa solubilità in acqua ma migliore solubilità nei solventi organici. Ci sono gruppi ionici nelle molecole, quindi hanno un certo grado di conduttività nell'acqua. Stabile a temperatura ambiente, ma facile da decomporre ad alta temperatura o in condizioni di acidi e alcali forti. Non c'è odore evidente, ma durante l'uso potrebbe essere emesso un leggero odore di composto organico. È un induttore comunemente usato utilizzato per indurre l'espressione proteica nei batteri. Nella diagnosi medica, l'IPTG può fungere da sonda fluorescente o agente cromogenico per rilevare molecole o tessuti specifici nei campioni. Combinandosi con le molecole bersaglio, l'IPTG può generare segnali fluorescenti o cambiamenti di colore, fornendo un forte supporto per la diagnosi della malattia.

Polvere Iptg,Parametri fisici, Mp. : 114 ~ 121 gradi C , Descrizione dell'uso , Reagenti comuni di biologia molecolare, comunemente utilizzati nello screening blu-bianco e nell'espressione proteica indotta da IPTG-nei batteri. , Specifiche di imballaggio , 1G, 5G, 25G, 100G, 1KG , Condizioni di conservazione

Refrigerato a 2-8 gradi, protetto dalla luce, Descrizione del pericolo, Codice di pericolo: Xi, Livello di rischio: R36/37/38, Livello di sicurezza: S23-24/25-36.

L'IPTG è comunemente utilizzato negli esperimenti di clonazione che devono indurre l'attività della -galattosidasi. Viene spesso utilizzato in combinazione con X-Gal o Bluo-Gal per lo screening blu-bianco di colonie batteriche ricombinanti, che possono essere indotte dal Chemicalbook ad esprimere l'operone lac in E. coli. L'IPTG si lega alla proteina repressore lacI e ne modifica la conformazione per prevenire l'inibizione del gene lacZ codificato dalla -galattosidasi.

L'IPTG, nome completo isopropil- -D-tiogalattoside, è un induttore comunemente utilizzato ampiamente utilizzato per indurre e regolare l'espressione proteica. A causa della sua struttura e funzione uniche, l'IPTG viene solitamente preparato utilizzandoPolvere Iptgmetodi di sintesi in laboratorio.

Polvere Iptgnome completo isopropil- - D-tiogalattoside è un induttore comunemente utilizzato ampiamente utilizzato per indurre e regolare l'espressione proteica.

1. Induzione dell'espressione proteica:

L'IPTG svolge un ruolo importante nell'induzione dell'espressione proteica. È un induttore ampiamente utilizzato che può indurre efficacemente l'espressione di geni specifici nei batteri, ottenendo così la proteina bersaglio desiderata in un breve periodo di tempo. Il suo meccanismo d'azione è quello di legarsi al gene lacI dei batteri, inibire l'attività della sua proteina regolatrice trascrizionale, aprendo così l'operone lac dei batteri e avviando l'espressione dei geni bersaglio. Quando si utilizzano gli operoni del lattosio come promotori dell'espressione proteica, sono necessari degli induttori e l'IPTG può agire come un analogo del lattosio per indurre l'espressione della galattosidasi nell'Escherichia coli. Non può essere utilizzato dalle cellule per ottenere un'espressione sostenuta. IPTG si lega a lac|prodotti, causando cambiamenti conformazionali lontano da lacO, attivando così la trascrizione. Questa regolazione trascrizionale inducibile è diventata un elemento comunemente utilizzato nella costruzione di vettori del sistema di espressione di E. coli.

2. Regolazione dell'espressione genica:

 

L'IPTG svolge un ruolo importante nella regolazione dell'espressione genica. Essendo un importante reagente sperimentale, svolge un ruolo importante nella regolazione dell'espressione genica e negli esperimenti di sovraespressione delle proteine. Controllando il tempo di aggiunta e la concentrazione di IPTG, è possibile ottenere la regolazione dell'espressione della proteina bersaglio. Questo effetto normativo si basa sul legame dell'IPTG con lac|prodotti negli operoni del lattosio, alterandone la conformazione, lasciando così lacO e attivando ulteriormente la trascrizione. Questo meccanismo di regolazione trascrizionale inducibile rende l'IPTG di grande importanza in campi di ricerca come la funzione genetica, le interazioni proteiche e lo screening farmacologico.

3. Cristallizzazione delle proteine:

 

Negli esperimenti di cristallizzazione delle proteine, l'IPTG viene utilizzato come induttore per promuovere la cristallizzazione delle proteine. Il suo meccanismo d'azione consiste nel modificare la conformazione delle proteine ​​legandosi alle regioni idrofobiche delle proteine, promuovendo così l'aggregazione e la cristallizzazione tra le molecole proteiche. Questo processo di aggregazione e cristallizzazione è reversibile, quindi la cristallizzazione delle proteine ​​può essere indotta aggiungendo IPTG, oppure i cristalli proteici possono essere sciolti rimuovendo IPTG.

Negli esperimenti di cristallizzazione delle proteine, l'IPTG viene solitamente aggiunto alla soluzione proteica come concentrazione finale di 1 mM. Questa bassa concentrazione di IPTG può evitare un'eccessiva induzione di proteine, ottenendo così migliori effetti di cristallizzazione. Allo stesso tempo, l'IPTG può anche fungere da chaperone molecolare per assistere nel corretto ripiegamento e aggregazione delle proteine, ottenendo così cristalli proteici più uniformi.
Va notato che l'IPTG non promuove la cristallizzazione delle proteine ​​in tutti i casi. Alcune proteine ​​non sono sensibili all'IPTG o, a causa della loro struttura intrinseca e delle loro proprietà che non sono adatte alla cristallizzazione, sono necessarie validazione sperimentale e ottimizzazione per diverse proteine ​​per determinare le condizioni e i metodi di cristallizzazione ottimali.

Citotossicità

 

Tossicità per le cellule procariotiche

Sebbene l'IPTG sia comunemente usato per indurre l'espressione genica nelle cellule procariotiche, alte concentrazioni di IPTG possono avere effetti tossici sulle cellule procariotiche. La ricerca ha dimostrato che quando la concentrazione di IPTG è troppo elevata, può interferire con i normali processi metabolici all’interno delle cellule. Ad esempio, può influenzare il metabolismo energetico delle cellule, interferire con percorsi come la glicolisi e il ciclo dell'acido tricarbossilico, portando a una diminuzione della produzione di ATP intracellulare e influenzando la crescita e la proliferazione cellulare. Inoltre, elevate concentrazioni di IPTG possono anche danneggiare l’integrità della membrana cellulare, aumentarne la permeabilità, portare alla fuoriuscita di sostanze intracellulari e consentire l’ingresso nella cellula di sostanze nocive provenienti dall’ambiente extracellulare, causandone così la morte. Gli esperimenti hanno scoperto che quando l'Escherichia coli viene coltivato in un terreno contenente alte concentrazioni di IPTG, il tasso di crescita dei batteri rallenta significativamente e il numero di batteri vitali diminuisce gradualmente con l'estensione del tempo di coltivazione. Ciò indica che alte concentrazioni di IPTG hanno un certo effetto inibitorio e letale sull'Escherichia coli.

Tossicità per le cellule eucariotiche

Oltre che per le cellule procariotiche, l’IPTG può essere tossico anche per le cellule eucariotiche. Esistono alcune differenze nella struttura e nella funzione tra le cellule eucariotiche e le cellule procariotiche, ma l'IPTG può comunque influenzare le normali funzioni fisiologiche delle cellule eucariotiche attraverso vari percorsi. Da un lato, l’IPTG può interferire con le vie di trasduzione del segnale all’interno delle cellule eucariotiche. La trasduzione del segnale all'interno delle cellule svolge un ruolo regolatorio cruciale in processi quali crescita, differenziazione e apoptosi. L'IPTG può alterare l'intensità e la direzione della trasduzione del segnale interagendo con alcune molecole di segnalazione all'interno delle cellule, influenzando così le normali attività fisiologiche delle cellule.

Tossicità per le cellule eucariotiche

D'altra parte, l'IPTG può indurre una risposta allo stress ossidativo nelle cellule eucariotiche. Lo stress ossidativo si riferisce a uno squilibrio tra l’ossidazione intracellulare e l’attività antiossidante, che porta ad un aumento della produzione di specie reattive dell’ossigeno (ROS). Un eccesso di ROS può attaccare biomolecole come DNA, proteine ​​e lipidi all'interno della cellula, causando danni cellulari e compromissione funzionale. La ricerca ha scoperto che in determinate condizioni, il trattamento IPTG delle cellule eucariotiche aumenta significativamente i livelli di ROS intracellulari, accompagnati da una diminuzione della vitalità cellulare e da un aumento del tasso di apoptosi. Ciò suggerisce che l’IPTG può indurre una risposta allo stress ossidativo ed esercitare tossicità sulle cellule eucariotiche.

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