Bremelanotide(collegamento:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/bremelanotide-powder-cas-189691-06-3.html) è un ormone polipeptidico sintetico la cui struttura è simile alla leptina, alla tirosina e alla melanina cutanea che esistono naturalmente nel corpo umano. Come nuovo tipo di farmaco, il Bremelanotide ha una funzione regolatrice e viene spesso utilizzato nel trattamento della disfunzione erettile e della bassa libido. Gli scenari di utilizzo nella vita quotidiana diventano sempre più estesi. Grazie alle ricerche approfondite su di lui, le persone hanno scoperto molti tipi dei suoi metodi di sintesi, che verranno analizzati uno per uno di seguito.
1. Sintetizzato da L-tirosina:
Nel metodo di sintesi originale, la struttura del Bremelanotide era ottenuta deformando la L-tirosina. Innanzitutto, la L-tirosina viene convertita in dipeptidil-L-tirosina (Boc-Tyr(OCO)2-OH) in presenza di acido fluoridrico, dove Boc rappresenta il gruppo succinimmidometil (t -butossicarbonile). Successivamente, aggiungere alcol benzilico (PhCH2OH), 1-(3-dietilaminopropossi)-2-(2-metazolil)etano (EDC) e N-idrossibutandiolo in tetraidrofurano (THF) Reagenti come l'immide (HOBt) può combinare la dipeptidil-L-tirosina con lo pseudopeptide alanina (Phe-Aib-Aib-Lys(Ac)-Gly-Lys(Ac)-Aib-Leu-NH2) è stato sintetizzato in Bremelanotide.
(1) Conversione della L-tirosina in dipeptidil-L-tirosina:
Innanzitutto, sciogliere la L-tirosina in acqua e aggiungere una quantità adeguata di acido fluoridrico. Tipicamente, la concentrazione di L-tirosina è 1M e la quantità di acido fluoridrico è 5-10%. La miscela è stata lasciata riposare a 0-4 gradi per 1 ora e poi raffreddata.
Successivamente, il complesso L-tirosina-acido fluoridrico ottenuto è stato aggiunto goccia a goccia al tetraidrofurano. Contemporaneamente al tetraidrofurano è stata aggiunta una quantità adeguata di reagenti di reazione quali alcol benzilico, EDC e HOBt. Dopo aver lasciato riposare per 2 ore sotto agitazione, si può ottenere la dipeptidil-L-tirosina (Boc-Tyr(OCO)2-OH).
(2) Reazione della dipeptidil-L-tirosina con lo pseudopeptide alanina:
Sciogliere la dipeptidil-L-tirosina ottenuta in N,N-dimetilformammide (DMF) e aggiungere lo pseudopeptide alanina. Le condizioni di reazione includono temperatura, tempo di reazione e concentrazione dei reagenti, ecc. Questi fattori influenzeranno la resa e la purezza del prodotto. Ad una concentrazione di 225 g/L, il rapporto tra Boc-Tyr(OCO)2-OH e lo pseudopeptide alanina era 1:30.
Dopo aver agitato e lasciato riposare in -N,N-dimetilformammide per 24 ore, la soluzione di reazione è stata versata in acqua ghiacciata e fatta precipitare con una soluzione di aldeide acida. Il risultato è il prodotto finale di Bremelanotide.
Il metodo di sintesi presenta principalmente i seguenti vantaggi: elevata purezza del prodotto e processo di produzione semplice. Ma questo metodo presenta anche alcuni svantaggi, come tempi lunghi, costi elevati e così via.
2. Sintesi in fase solida:
La sintesi in fase solida è attualmente uno dei metodi di sintesi più comunemente utilizzati per Bremelanotide ed è anche uno dei principali metodi di sintesi nel campo della sintesi dei peptidi. Nei metodi in fase solida, le catene polipeptidiche vengono costruite mediante aggiunte successive di unità di aminoacidi. Innanzitutto, la prima unità di amminoacidi viene modificata in un gruppo N-protettivo stericamente restrittivo e non degradabile (come Fmoc), che viene poi attaccato al mezzo poroso. Successivamente, introducendo il gruppo protettivo dell'acido acrilico, la reazione di acilazione e altre fasi, ciascuna unità di amminoacido viene aggiunta al mezzo poroso e viene gradualmente costruita una catena polipeptidica completa. Infine, nelle fasi di rimozione del gruppo N-protettivo, denitrificazione, ecc., può essere preparata una catena polipeptidica bremelanotide con una sequenza specifica.
Il metodo di sintesi in fase solida presenta principalmente i seguenti vantaggi: alta efficienza e alto tasso di utilizzo delle materie prime. Ma questo metodo sintetico presenta anche alcuni svantaggi, come nel processo di produzione sono necessarie più fasi di asciugatura e lavaggio e queste fasi porteranno a un calo della qualità del prodotto.
3. Sintesi in fase liquida:
La sintesi in fase liquida è un altro metodo di sintesi di Bremelanotide, che viene effettuato attraverso un sistema di reazione liquida. Le fasi principali del metodo di sintesi comprendono lo screening delle materie prime, la progettazione della molecola del farmaco, la selezione del percorso di sintesi, la reazione, la purificazione e simili. Rispetto alla sintesi in fase solida, il metodo di sintesi in fase liquida può ottenere Bremelanotide con purezza e attività biologica più elevate. Nel metodo di sintesi in fase liquida, i reagenti di reazione comunemente usati sono il diidrossietil mercaptano (EDT), l'agente etossicarbonilante (EEDQ), il tioacetil cloruro, ecc.
Il metodo di sintesi in fase liquida presenta principalmente i seguenti vantaggi: funzionamento semplice ed elevata purezza del prodotto. Tuttavia, questo metodo di sintesi presenta anche alcuni svantaggi, come un periodo di sintesi più lungo e un costo più elevato.
4. Sintesi fisico-chimica:
Nel metodo di sintesi fisico-chimica, Bremelanotide viene sintetizzato mediante metodi fisici e chimici. Questo metodo ha principalmente due approcci diversi: uno consiste nel realizzare la sintesi di Bremelanotide attraverso operazioni ripetute di trasformazione della fase solido-liquido; l'altro è promuovere l'autoassemblaggio e la polimerizzazione delle catene polipeptidiche attraverso la compressione fisica e meccanica, sintetizzando così il Bremelanotide.
Meccanismo di reazione:
La sintesi di Bremelanotide avviene principalmente convertendo la L-tirosina in acilato L-fenolico, quindi sintetizzando l'acilato L-fenolico e lo pseudopeptide e infine ottenendo il prodotto. Il meccanismo della reazione è il seguente:
(1) Conversione di L-tirosina in L-fenolo acilato:
La L-tirosina reagisce con la sodio azide nella soluzione di THF per generare L-fenolo acilato. La sodio azide convertirà il gruppo ossidrile della tirosina in un gruppo azide, quindi il trattamento acido convertirà il gruppo azide in un acilato fenolico.
(2) L-fenolo acilato viene convertito in cloruro acido:
L'acilato L-fenolico reagisce con il cloruro di acetile in THF per produrre cloruro acido. Cinque volte la quantità di TBHS deve assorbire l'HCl generato. I cloruri acidi sono intermedi di reazione necessari per le reazioni successive.
(3) Sintesi di cloruro acido e pseudopeptide:
Il cloruro acido intermedio reagisce con lo pseudopeptide nel DMF per generare la catena polipeptidica di Bremelanotide. Ciò che accade in questa fase è una reazione di condensazione dell'anidride, in cui HOBt è il catalizzatore.
(4) Purificazione e analisi del prodotto:
Anche il prodotto finale deve essere purificato e analizzato per garantire la purezza e la qualità del composto.
Il metodo di sintesi fisico-chimica presenta principalmente i seguenti vantaggi: funzionamento semplice e breve periodo di preparazione. Tuttavia, questo metodo sintetico presenta anche alcuni svantaggi, come la bassa purezza del prodotto e l’insufficiente diversità del prodotto.
In conclusione, i metodi di sintesi di Bremelanotide sono diversi e flessibili e la selezione dipende da molti fattori, come condizioni di reazione, costi di sintesi e tempi di reazione, ecc. Indipendentemente dal metodo utilizzato, condizioni di reazione stabili e prodotti di elevata purezza sono i più importanti chiavi per la riuscita sintesi di Bremelanotide.