Tampone BIS-TRIS CAS 6976-37-0

È un tampone biologico efficiente con un intervallo tampone di pH efficace di 5,8-7,2 e un valore pKa di 6,5 (25 gradi). Negli esperimenti biochimici, molte biomolecole come proteine ​​e acidi nucleici sono altamente sensibili ai valori di pH e anche piccoli cambiamenti nel pH possono influenzarne la struttura e la funzione. BIS-TRIS può stabilizzare il valore del pH della soluzione all'interno di questo intervallo di pH, fornendo un ambiente stabile per le reazioni biochimiche. Nel processo di separazione e purificazione delle proteine, la conformazione naturale della proteina può essere mantenuta per prevenire la denaturazione o la precipitazione dovuta alle variazioni di pH.

Ad esempio, nelle tecniche di purificazione delle proteine ​​come la cromatografia a scambio ionico e la cromatografia di affinità, l'uso diBuffer BIS-TRISpuò garantire che l'interazione tra proteine ​​e mezzi cromatografici avvenga in condizioni di pH stabili, migliorando così l'efficienza e la purezza della purificazione.

Nei test dell'attività enzimatica, l'attività enzimatica spesso dipende da uno specifico ambiente di pH. Il valore del pH del sistema di reazione può essere controllato con precisione per consentire all'enzima di esercitare attività catalitica in condizioni di pH ottimali, misurando così accuratamente l'attività dell'enzima. Ciò è di grande importanza per studiare le proprietà, i meccanismi d'azione e lo sviluppo di preparazioni enzimatiche di enzimi.

BIS-TRIS ha la capacità di coordinarsi con vari ioni metallici e formare complessi stabili, come Zn ² ⁺ - BIS-TRIS, Mn ² ⁺ - BIS-TRIS, ecc. Questi complessi di ioni metallici svolgono un ruolo importante nello studio della struttura e della funzione delle biomolecole. Nell'analisi strutturale delle proteine, gli ioni metallici spesso agiscono come cofattori per partecipare nella formazione di centri attivi nelle proteine. Coordinando BIS-TRIS con gli ioni metallici, è possibile stabilizzare la struttura dei complessi proteici di ioni metallici, rendendo più semplice l'uso di tecniche come la cristallografia a raggi X e la risonanza magnetica nucleare (NMR) per l'analisi strutturale.

Ad esempio, i centri attivi di alcuni enzimi contenenti zinco richiedono ioni zinco per mantenere la loro attività catalitica e i complessi BIS-TRIS Zn ² ⁺ possono fornire un ambiente strutturale stabile per questi enzimi, che aiuta ad analizzare accuratamente le loro strutture tridimensionali.

Nella ricerca sugli acidi nucleici come il sequenziamento del DNA, gli ioni metallici possono anche essere coinvolti nel ripiegamento e nella regolazione funzionale degli acidi nucleici. La coordinazione tra BIS-TRIS e gli ioni metallici può regolare l'ambiente locale degli acidi nucleici, influenzando le interazioni tra acidi nucleici e proteine, piccole molecole, ecc., fornendo un potente strumento per la ricerca approfondita sulla struttura e sulla funzione degli acidi nucleici.

BIS-TRIS ha importanti applicazioni negli esperimenti di elettroforesi delle proteine. SDS-PAGE (elettroforesi su gel di poliacrilammide con sodio dodecil solfato) e Native PAGE (elettroforesi su gel di poliacrilammide non denaturante) sono tecniche comuni di elettroforesi proteica.Buffer BIS-TRISviene spesso utilizzato per preparare il tampone dell'elettroforesi per mantenere la stabilità del pH della soluzione durante l'elettroforesi. Nell'SDS-PAGE, le proteine ​​vengono denaturate e caricate negativamente in un tampone campione contenente SDS e mercaptoetanolo, quindi separate in base alle dimensioni molecolari nel gel di poliacrilammide.

Può garantire la stabilità del valore pH del tampone di elettroforesi, consentendo alle proteine ​​di migrare nel modo previsto in un campo elettrico, separando così accuratamente proteine ​​di diversi pesi molecolari e rilevando i loro relativi pesi molecolari.

Nella PAGINA nativa, le proteine ​​mantengono la loro conformazione naturale per la separazione elettroforetica. Il suo utilizzo può prevenire la denaturazione delle proteine ​​dovuta ai cambiamenti del pH, preservare l'attività naturale e le informazioni conformazionali delle proteine ​​e aiutare a studiare lo stato naturale e le interazioni delle proteine.

Il Western blotting è un'importante tecnica sperimentale utilizzata per rilevare il livello di espressione delle proteine ​​​​bersaglio. Il tampone di propano Bis Tris viene spesso utilizzato come tampone di trasporto delle proteine ​​negli esperimenti di immunoblotting.

Durante il trasferimento delle proteine ​​dal gel alla membrana, il tampone propano Bis Tris può mantenere un ambiente a pH stabile, garantendo che la proteina venga trasferita alla membrana con conformazione e stato di carica corretti. Ciò è fondamentale per il successivo legame dell'anticorpo e il rilevamento del segnale.

Se le proteine ​​subiscono denaturazione o cambiamenti conformazionali durante il processo di trasferimento, gli anticorpi potrebbero non essere in grado di riconoscere accuratamente la proteina bersaglio, influenzando così l'accuratezza dei risultati sperimentali. Pertanto, il tampone di propano Bis Tris svolge un ruolo cruciale negli esperimenti di immunoblotting, contribuendo a migliorare la sensibilità e l'affidabilità degli esperimenti.

La coltura cellulare è una tecnologia importante nella ricerca biomedica e il valore del pH del terreno di coltura cellulare ha un impatto significativo sulla crescita e sul metabolismo cellulare. Il tampone propano BIS-TRIS può essere utilizzato per la preparazione di terreni di coltura cellulare per mantenere un valore di pH stabile durante il processo di coltura cellulare.

Diversi tipi di cellule hanno requisiti di pH diversi, ma generalmente richiedono la crescita in un ambiente vicino al pH fisiologico (circa 7,2-7,4).

Il tampone di propano BIS-TRIS può tamponare le variazioni di pH del terreno di coltura durante la coltura cellulare, prevenire le fluttuazioni di pH causate dall'accumulo di prodotti metabolici, dallo scambio di gas e da altri fattori e fornire un ambiente di crescita stabile per le cellule. Ciò è di grande importanza per la normale crescita, proliferazione ed espressione funzionale delle cellule, contribuendo a migliorare il tasso di successo della coltura cellulare e l'affidabilità dei risultati sperimentali.

L'elettroforesi degli acidi nucleici è un metodo comunemente utilizzato per rilevare la lunghezza e la concentrazione degli acidi nucleici target, inclusa l'elettroforesi del DNA e dell'RNA. Adatto per esperimenti di elettroforesi sugli acidi nucleici, può mantenere la stabilità del pH del tampone di elettroforesi.

Nell'elettroforesi degli acidi nucleici, le molecole di acido nucleico migrano sotto l'azione di un campo elettrico in base alle loro dimensioni e alle proprietà di carica.

Può garantire la stabilità del valore pH della soluzione durante l'elettroforesi, consentendo alle molecole di acido nucleico di migrare nel modo previsto, separando così accuratamente frammenti di acido nucleico di diverse lunghezze e rilevandone le concentrazioni. Ciò è di grande importanza per la ricerca come la clonazione genetica, l'analisi dell'espressione genica e il sequenziamento degli acidi nucleici.

BIS-TRIS può essere utilizzato anche per rilevare la creatina chinasi. La creatina chinasi è un enzima importante che svolge un ruolo cruciale nel metabolismo energetico muscolare. La determinazione della sua attività è di grande importanza per la diagnosi delle malattie muscolari e la valutazione degli infortuni sportivi. Nell'esperimento di rilevamento della creatina chinasi, la stabilità del pH del sistema di reazione può essere mantenuta per garantire che l'enzima presenti attività catalitica in condizioni di pH ottimali. Controllando con precisione il valore del pH, è possibile migliorare l'accuratezza e l'affidabilità della misurazione dell'attività della creatina chinasi, fornendo un forte supporto alla diagnosi e alla ricerca clinica.

BIS-TRIS svolge anche un ruolo importante nella ricerca e nell'applicazione dell'emoglobina. Durante il processo di separazione dell'emoglobina, la sua stabilità e attività possono essere mantenute per prevenire la denaturazione o l'aggregazione dovuta alle variazioni del pH. Ciò è di grande importanza per la purificazione e la ricerca strutturale dell'emoglobina.

BIS-TRIS può proteggere efficacemente l'emoglobina durante il processo di liofilizzazione-. La liofilizzazione è un metodo comunemente utilizzato per conservare i prodotti biologici, ma le proteine ​​possono essere danneggiate durante il processo di congelamento ed essiccazione. Può fornire un ambiente stabile per l'emoglobina durante il processo di liofilizzazione-, ridurre la denaturazione e l'inattivazione delle proteine ​​e migliorare l'attività e la stabilità dell'emoglobina dopo la liofilizzazione-.

L'IEF (elettroforesi di focalizzazione isoelettrica) e l'elettroforesi su gel 2-D sono tecniche comuni nella ricerca proteomica, utilizzate per separare e analizzare miscele proteiche complesse. BIS-TRIS può essere utilizzato come elettrolita catodico per l'elettroforesi su gel IEF/2-D.

Durante il processo IEF, le proteine ​​migrano e si concentrano secondo un gradiente di pH basato sul loro punto isoelettrico. Il catolita BIS-TRIS può mantenere la stabilità del pH del tampone di elettroforesi, garantendo che le proteine ​​possano migrare accuratamente al loro punto isoelettrico durante il processo di focalizzazione isoelettrica. Nell'elettroforesi su gel 2D, l'uso diBuffer BIS-TRISaiuta inoltre a migliorare l'effetto di separazione e la risoluzione delle proteine, fornendo dati di alta-qualità per la ricerca proteomica.